Systemischer Injektionstest
1. Biologische Wirkung: In Vivo-Tests
2. Bearbeitungszeit: 6 Wochen (nach Genehmigung durch die lokale Ethikkommission)
3. Anforderungen an die Probe:
USP
individuell zu bestimmen;
4. Anzahl der Tiere: 40 Mäuse
USP <88>
Dieser Test dient zur Bewertung der systemischen Reaktionen auf die Extrakte der zu prüfenden Materialien nach Injektion in Mäuse.
Test-Tiere
Es sind gesunde, noch nicht verwendete Albinomäuse mit einem Gewicht zwischen 17 und 23 g zu verwenden. Für jede Versuchsgruppe sind nur Mäuse derselben Herkunft zu verwenden. Wasser und Futter, das üblicherweise für Labortiere verwendet wird und eine bekannte Zusammensetzung aufweist, ad libitum zur Verfügung stellen.
Verfahren
Jeder der fünf Mäuse einer Testgruppe wird die Probe oder der Blindversuch injiziert, wobei jedes g des mit Polyethylenglykol 400 hergestellten Probenextrakts und der entsprechende Blindversuch mit 4,1 Volumina Natriumchloridinjektion verdünnt wird, um eine Lösung mit einer Konzentration von etwa 200 mg Polyethylenglykol pro ml zu erhalten.
| EXTRAKT ODER LEERWERT | DOSIERUNG PRO KG | ROUTE | INJEKTIONSRATE (μL pro Sekunde) |
|---|---|---|---|
| Natriumchlorid-Injektion | 50 mL | intravenös | 100 |
| 1:20-Lösung von Alkohol in Natriumchlorid-Injektion | 50 mL | intravenös | 100 |
| Polyäthylenglykol 400 | 10 g | intraperitoneal | – |
| Pflanzenöl | 50 mL | intraperitoneal | – |
Beobachtung
Die Tiere sind unmittelbar nach der Injektion, erneut 4 Stunden nach der Injektion und dann mindestens 24, 48 und 72 Stunden lang zu beobachten. Zeigt während des Beobachtungszeitraums keines der mit dem Extrakt der Probe behandelten Tiere eine signifikant höhere biologische Reaktivität als die mit dem Blindpräparat behandelten Tiere, erfüllt die Probe die Anforderungen dieses Tests. Sterben zwei oder mehr Mäuse oder treten bei zwei oder mehr Mäusen abnormale Verhaltensweisen wie Krämpfe oder Erschöpfung auf, oder kommt es bei drei oder mehr Mäusen zu einem Körpergewichtsverlust von mehr als 2 g, so erfüllt die Probe nicht die Anforderungen des Tests. Zeigen alle mit der Probe behandelten Tiere nur leichte Anzeichen einer biologischen Reaktivität und zeigt nicht mehr als ein Tier grobe Symptome einer biologischen Reaktivität oder stirbt, ist der Test mit Gruppen von 10 Mäusen zu wiederholen. Beim Wiederholungstest zeigen alle 10 mit der Probe behandelten Tiere während des Beobachtungszeitraums keine signifikante biologische Aktivität im Vergleich zu den Blank-Tieren.
