Intrakutaner Test

1. Biologische Wirkung: Intrakutan-Test
2. Durchlaufzeit: 4 Wochen (nach Genehmigung durch die lokale Ethikkommission)
3. Anforderungen an die Probe:

USP

individuell zu bestimmen;

4. Tierzahl: 4 Kaninchen

USP <88>

Dieser Test dient der Bewertung lokaler Reaktionen auf die Extrakte der zu prüfenden Materialien nach intrakutaner Injektion in Kaninchen.

Testtiere

Es sind gesunde, dünnhäutige Albino-Kaninchen auszuwählen, deren Fell kurz geschoren werden kann und deren Haut frei von mechanischen Reizungen oder Verletzungen ist. Beim Umgang mit den Tieren ist es zu vermeiden, die Injektionsstellen während der Beobachtungszeit zu berühren, es sei denn, um zwischen Ödemen und Ölrückständen zu unterscheiden.

Verfahren

Am Tag der Prüfung wird das Fell des Tieres auf beiden Seiten der Wirbelsäule auf einer ausreichend großen Testfläche eng geschoren. Mechanische Reizung und Trauma sind zu vermeiden. Lose Haare werden mit einem Staubsauger entfernt. Falls erforderlich, die Haut vor der Injektion leicht mit verdünntem Alkohol abtupfen und abtrocknen. Pro Kaninchen kann mehr als ein Extrakt aus einem bestimmten Material verwendet werden, wenn sichergestellt ist, dass die Testergebnisse nicht beeinträchtigt werden. Für jede Probe sind zwei Tiere zu verwenden, die jeweils intrakutan injiziert werden, wobei eine Seite des Tieres für die Probe und die andere Seite für den Blindversuch verwendet wird.

Beobachtung

Untersuchen Sie die Injektionsstellen auf Anzeichen von Gewebereaktionen wie Erytheme, Ödeme und Nekrosen. Tupfen Sie die Haut gegebenenfalls leicht mit verdünntem Alkohol ab, um das Ablesen der Injektionsstellen zu erleichtern. Beobachten Sie alle Tiere 24, 48 und 72 Stunden nach der Injektion. Bewerten Sie die Beobachtungen auf einer numerischen Skala für den Extrakt der Probe und für den Blindversuch. Befestigen Sie das Fell während des Beobachtungszeitraums nach Bedarf neu. Die durchschnittlichen Erythem- und Ödemwerte für die Stellen der Probe und des Blindpräparats werden in jedem Bewertungsintervall (24, 48 und 72 Stunden) für jedes Kaninchen ermittelt. Nach der 72-Stunden-Bewertung werden alle Erythem- und Ödemwerte für jede Probe und jeden Rohling separat summiert. Die Gesamtwerte werden durch 12 geteilt (2 Tiere × 3 Bewertungszeiträume × 2 Bewertungskategorien), um den Gesamtmittelwert für jede Probe im Vergleich zum entsprechenden Leerwert zu ermitteln. Die Anforderungen des Tests sind erfuellt, wenn die Differenz zwischen dem Mittelwert der Probe und dem des Blindversuchs 1,0 oder weniger beträgt. Wenn in einem beliebigen Beobachtungszeitraum die durchschnittliche Reaktion auf die Probe fragwürdigerweise größer ist als die durchschnittliche Reaktion auf den Blindversuch, ist der Test mit drei weiteren Kaninchen zu wiederholen. Die Anforderungen des Tests sind erfüllt, wenn die Differenz zwischen dem Mittelwert der Probe und dem Mittelwert des Leerwertes 1,0 oder weniger beträgt.