Cytotoxicité XTT

1. Effet biologique : Tests de cytotoxicité
2. Délai d’exécution : 4 semaines
3. Exigences en matière d’échantillons :

ISO

120 cm² (élément d’essai > 0,5 mm d’épaisseur) ;
60 cm² (élément d’essai ≥ 0,5 mm d’épaisseur) ;
4 grammes ;
5 ml ;

ISO 10993-5

Le but de l’étude est de déterminer la réactivité biologique potentielle d’une culture de cellules de mammifères (lignée cellulaire L929) en réponse à l’extrait du dispositif médical. L’élément testé est extrait dans un MEM avec 10 % de FBS (sérum bovin fœtal) pendant 24 heures à 37 °C ou 72 heures à 37 °C (implants permanents ou dispositif médical à exposition prolongée). On laisse les cellules se développer jusqu’à sous-confluence dans des plaques de culture tissulaire et on les expose à l’extrait de l’élément testé à au moins 4 concentrations (100 % toujours inclus) en 6 répétitions. Les plaques sont incubées pendant 24 heures à 37 °C, après quoi la viabilité est évaluée par la réduction du XTT jaune soluble dans l’eau par les enzymes réductases mitochondriales en formazan orange soluble dans l’eau. Le nombre de cellules viables correspond à l’intensité de la couleur déterminée par des mesures photométriques. Le dispositif médical est considéré comme non cytotoxique si le pourcentage de cellules viables est égal ou supérieur à 70 % du contrôle non traité.