Test d’injection systémique
1. Effet biologique : Tests in vivo
2. Délai d’exécution : 6 semaines (après approbation du comité d’éthique local)
3. Exigences en matière d’échantillons :
USP
à déterminer individuellement ;
4. Quantité d’animaux : 40 souris
USP <88>
Ce test est conçu pour évaluer les réponses systémiques aux extraits des matériaux testés après injection chez la souris.
Animaux de laboratoire
Utiliser des souris albinos saines, n’ayant jamais été utilisées auparavant et pesant entre 17 et 23 g. Pour chaque groupe d’essai, n’utiliser que des souris de la même origine. Fournir de l’eau et de la nourriture, couramment utilisées pour les animaux de laboratoire et de composition connue, ad libitum.
Procédure
Injecter à chacune des cinq souris d’un groupe test l’échantillon ou le blanc, sauf pour diluer chaque g d’extrait de l’échantillon préparé avec du polyéthylène glycol 400, et le blanc correspondant, avec 4,1 volumes de chlorure de sodium injectable pour obtenir une solution ayant une concentration d’environ 200 mg de polyéthylène glycol par ml.
| EXTRAIT OU BLANC | DOSE PAR KG | ROUTE | TAUX D’INJECTION (μL par seconde) |
|---|---|---|---|
| Chlorure de sodium injectable | 50 ml | intraveineuse | 100 |
| 1 in 20 solution of Alcohol in Chlorure de sodium injectable | 50 ml | intraveineuse | 100 |
| Polyéthylène glycol 400 | 10 g | intrapéritonéal | – |
| Huile végétale | 50 ml | intrapéritonéal | – |
Observation
Observer les animaux immédiatement après l’injection, à nouveau 4 h après l’injection, puis au moins 24, 48 et 72 h. Si, au cours de la période d’observation, aucun des animaux traités avec l’extrait de l’échantillon ne présente une réactivité biologique significativement supérieure à celle des animaux traités avec le Blanc, l’échantillon répond aux exigences de ce test. Si deux souris ou plus meurent, ou si un comportement anormal tel que convulsions ou prostration se produit chez deux souris ou plus, ou si une perte de poids corporel supérieure à 2 g se produit chez trois souris ou plus, l’échantillon ne satisfait pas aux exigences de l’essai. Si les animaux traités avec l’échantillon ne présentent que de légers signes de réactivité biologique et que pas plus d’un animal ne présente des symptômes flagrants de réactivité biologique ou ne meurt, répéter l’essai en utilisant des groupes de 10 souris. Lors du nouveau test, les 10 animaux traités avec l’échantillon ne présentent aucune activité biologique significative par rapport aux animaux vierges pendant la période d’observation.